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          小鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒

          簡要描述:上海恒遠生物供應進口“小鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒",我司專業代理國外R&D品牌試劑盒,各種標本、種屬、具體指標齊全,品種多,質量好,靈敏度高,試劑盒價格洽談,。

          • 產品型號:
          • 廠商性質:生產廠家
          • 更新時間:2016-03-20
          • 訪  問  量:2682
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              產品規格:96T/48T 
              96T指可以做94個標本,2個標準對照 
              48T指可以做47個標本,1個標準對照 
              96T-84個樣本 
              48T-42個樣本 
              操作步驟 
              1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 
              3600 pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 
              1800pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 
              900pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 
              450 pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 
              225pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 
               
               
              2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 
              3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 
              4.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用 
              5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 
              6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
              7.溫育:操作同3。 
              8.洗滌:操作同5。 
              9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
              10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 
              11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。 
              Assay procedure 
              1.Dilute and add sample:Dilute Original density Standard as follow table: 
              800 nmol/L5 Standard150μl Original density Standard+150μl Standard diluent 
              400 nmol/L4 Standard150μl 5 Standard+150μl Standard diluent 
              200 nmol/L3 Standard150μl 4 Standard+150μl Standard diluent 
              100 nmol/L2 Standard150μl 3 Standard +150μl Standard diluent 
              50 nmol/L1 Standard150μl 2 Standard +150μl Standard diluent 
              2.add sample:Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix. 
              3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃. 
              4.Configurate liquid: 30-fold wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve. 
              5.washing:Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat. 
              6.add enzyme:Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except blank well. 
              7.incubate:Operation with 3. 
              8.washing:Operation with 5. 
              9.color:Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃ 
              10.Stop the reaction:Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color). 
              11.assay:take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min. 
              小鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒免費代測,本試劑盒詳細說明書歡迎您來電索取。

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